MVZ Blanca E. Bautista Cruz
Asesor Técnico y Ventas Reactivos Diagnósticos IASA
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En la actualidad la práctica de la medicina veterinaria se debe enfocar al establecimiento de medidas que permitan prevenir situaciones de enfermedad que afecten los parámetros productivos y por ende la rentabilidad casinoscapital.com de las explotaciones. El conocimiento de la incidencia de las enfermedades en nuestra zona, así como el estatus de anticuerpos obtenidos por nuestros calendarios de vacunación nos permitirá tener una visión del panorama de nuestras parvadas.
La utilización de la pruebas serológicas en el diagnóstico de las enfermedades de los animales es una de las más importantes herramientas para establecer un excelente programa de medicina preventiva. La información obtenida por éstas debe ser analizada en conjunto con la información de los parámetros productivos y el calendario de vacunación.
En los últimos años la utilización de la técnica de ELISA se ha extendido ampliamente por ser sencilla, rápida y estandarizada. Existen varias opciones comerciales disponibles en el mercado, cada una de ellas con diferencias en los criterios para considerar a un suero positivo o negativo, es por ello importante para el usuario saber interpretar los resultados obtenidos de la marca de ELISA que ha seleccionado. A continuación se desglosarán los conceptos que se presentan en un tipo de reporte de ELISA.
Age: Edad del animal
Assay: Ensayo
Block (% de Bloqueo): Es la intensidad del cambio de color desarrollado en la muestra en comparación con el suero control negativo. Este valor es directamente proporcional a la cantidad de anticuerpos de la enfermedad analizada, contenidos en la muestra. El valor de bloqueo más alto que puede tener una muestra es de 100. Se calcula de la siguiente manera:
ODNEG. PROMEDIO DE LA DENSIDAD ÓPTICA DEL CONTROL NEGATIVO. DOMUESTRA. DENSIDAD ÓPTICA DE LA MUESTRA.
Case (caso): Identificación de los sueros analizados.
Count: Cantidad de sueros.
Date: Fecha
Dil (dilución): Factor de dilución del (os) suero (os) que se analizó
ELISA (Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay). Es un inmunoensayo ligado a enzimas. Se basa en la reacción antígeni-anticuerpo, uno de estos componentes está fijado a una placa, el otro se unirá a un conjugado. Esta reacción se hace visible mediante la adición de un cromógeno específico, éste se une a la enzima del conjugado y se produce una reacción colorimétrica, la cual será cuantificada a través de un lector de placas de ELISA.
Gmean (Media Geométrica): Es el promedio geométrico del valor S/P, S/N o título de los sueros anali- zados después de haber eliminado el valor mínimo y máximo, con esto obtenemos una información más apegada a la realidad de la población analizada.
Histograma: Es la representación gráfica de los valores obtenidos en la prueba de ELISA (S/P, S/N, positivo, negativo, sospechoso), en forma de barras. Estas indican la frecuencia que se observa en cada rango de valor. Estos rangos los establece el fabricante.
Kit lot: Número de lote de la prueba de ELISA que se utilizó para realizar el análisis.
Max: Es el valor S/P, S/N o título más alto detectado. Mean (Promedio): Promedio de los valores obtenidos
en la ELISA
Min: Es el valor S/P, S/N o título más bajo detectado.
Punto de corte. Valor expresado en S/P, S/N, título, % inhibición, % bloqueo o DO corregida a partir del cual una muestra se clasifica positiva, negativa y/o sospecho- sa. Este punto de corte es específico para cada ELISA y para cada marca comercial, por lo que es importante conocer la marca de ELISA que estamos utilizando.
Por ejemplo para la prueba de la Anemia Infecciosa Aviar (Flock Chek CAV 10/ IDEXX) el punto de corte es con S/N 0.6, es decir que las muestras con valores S/N mayores de 0.6 son Negativas, los sueros con valor S/N menor o igual a 0.6 se clasifican Positivas.
OD (optical density). En términos prácticos la densidad óptica es una medida que nos indica el desarrollo de color en un pozo determinado, esta medida sólo es utilizada para los controles del kit. La OD de una muestra es un dato sin valor para el diagnóstico.
S/N (sample / control Negativo): En español el término M/N (muestra / control negativo). El valor S/N es la intensidad del cambio de color desarrollado en el suero problema en comparación con el suero control negativo. Este valor es directamente proporcional a la cantidad de anticuerpos de la enfermedad analizada, contenidos en la muestra. Se calcula de la siguiente manera:
CNX. PROMEDIO DEL CONTROL NEGATIVO
ODMUESTRA. DENSIDAD ÓPTICA DE LA MUESTRA ANALIZADA
S/P (sample / control Positivo): en español el termino M/P (muestra / control positivo). El valor S/P es la intensidad del cambio de color desarrollado en el suero problema en comparación con el suero control positivo. Este valor es directamente proporcional a la cantidad de anticuerpos de la enfermedad analizada, contenidos en la muestra. Se calcula de la siguiente manera:
CPX. PROMEDIO DEL CONTROL POSITIVO. DEL CONTROL NEGATIVO CNX. PROMEDIO
ODmuestra. Densidad óptica de la muestra.
S/P groups: rangos de valores S/P.
SD (Desviación estándar): Es la medida de dispersión de un conjunto de datos en relación al promedio, es decir qué tan alejados están los valores S/P, S/N o título de la media.
Tech: Iniciales del Técnico que realizó la prueba.
Título de anticuerpos: Cantidad de anticuerpos específicos para un antígeno contenidos en el volumen de suero analizado.
Well: Número de celda de la placa de ELISA en donde está colocada la muestra.
% CV (Coeficiente de variación): Es la medida estadística que nos indica la variación que existe en la población evaluada. Nos da información sobre la uniformidad de los anticuerpos de la población analizada.
Para que la información obtenida con la ELISA sea útil y refleje el estado sanitario del hato/ parvada/ piara, es importante que el número de muestras sea estadísticamente representativo, para ello es importante considerar el número de animales de la explotación.
Existen tablas que ayudan a determinar el tamaño de la muestra de acuerdo al número de animales y a la prevalencia (ver cuadro 5). También es importante considerar todas las áreas de la explotación.
Por ejemplo Mycoplasmosis
Objetivo: Evitar la transmisión vertical.
Para detectar la prevalencia del 1% con 95% de confianza, se deben muestrear a las bisabuelas, abuelas y reproductoras. El tamaño de la muestra de una población de 10,000 debe ser de 294 aves de por lo menos 3 edades.
Para una correcta integración de los resultados de ELISA a el diagnóstico presuntivo se deben relacionar los resultados de la ELISA con el programa de vacunación, tipo de vacuna, vía de aplicación, edad de administración de la vacuna, signos que se observen en los animales, parámetros productivos, % de abortos, mortalidad, etc. Considerar toda la información permite tener un enfoque global de la explotación y así implementar o modificar el programa sanitario.
Nota: Este ejemplo de reporte corresponde a las ELISAs de la marca IDEXX.
Artículo publicado en Los Avicultores y su Entorno
